




單分散無孔微球由于粒徑均一,粒徑大小精l確可控,因此把單分散無孔微球填充在層析柱中,其球與球之間形成的空隙大小及形狀是可控的。這種空隙大小是由單分散聚合物微球大小決定的,連續(xù)流層析,微球越小,間隙越小,因此層析柱的孔隙可以通過改變無孔微球粒徑大小來進行精l確調節(jié)。納微已開發(fā)出世l界領l先的微球制造技術,該技術可以對微球大小,層析介質,均勻性進行前l所未有的控制。利用該技術優(yōu)勢納微開發(fā)出病毒的單分散無孔聚合物層析介質,Protein A親和捕獲,由于層析柱孔隙大小可控、耐壓性好、柱床穩(wěn)定、柱效高、分辨率高等優(yōu)點,因此可以顯著提高病毒的純化效率,單分散層析介質,大幅度提升病毒的純度。這種方法非常適用實驗室分離純化病毒樣品,但該方法使用的是實心球,因此比表面積低,病毒吸附載量低,不適合大規(guī)模分離純化病毒或類病毒(疫l苗)。
高柱床提高抗l體批處理量和生產效率 目前GE 生產的Protein A 軟膠占據(jù)抗l體分離純化的90%市場。由于軟膠機械強度差,耐壓受限(壓力小于3公斤),為了防止柱床塌陷,一般柱床只裝到15cm高度,嚴重限制抗l體的生產效率,增加抗l體的生產成本。柱床高不僅可以增加抗l體的批處理量,提供抗l體的生產效率,還可以減少QA及QC等配套人員的工作量,減少純化系統(tǒng)的數(shù)量及設備***。其實,通過高柱床提高生產效率的方法早在成本更加敏感的胰島素、白蛋白、多肽等生物藥生產上成功實現(xiàn)。但要增加柱床高度,Protein A 介質必須具有高機械強度性能,以滿足高柱床高流速下產生的壓力。納微開發(fā)的新一代單分散Protein A 介質是以高交聯(lián)的單分散聚丙l烯酸酯為基質,機械強度高,耐壓性能好。因此柱床可以裝到40cm以上高度,使得抗l體批處理量及生產效率可以提高一倍以上,不僅減少設備***及廠房的占用面積,而且大幅度降低生產成本。另外實驗證明提高柱床還可以提高介質有效載量和利用率,柱床提高一倍,抗l體上樣量至少增加2.2倍(見表)。高柱床可以解決因為上游發(fā)酵規(guī)模的擴大及蛋白表達量的增加而帶來下游分離純化生產瓶頸的問題。另外軟膠放大往往只能通過等高放大,而納微生產的高機械強度Protein A 可以等保留時間放大。


層析介質材料種類及其對生物分離性能的影響

目前市場上用于生物分離層析介質主要由兩大類材料組成:類是以瓊脂糖,葡聚糖為代表的天然高分子層析介質;第二類是以聚乙烯和聚丙l烯酸酯為代表的合成高分子層析介質。其中合成高分子微球可以精l確控制其粒徑大小,粒徑均勻性,并更多范圍調節(jié)孔徑大小,因此具有通透性高,分子傳質速度快,有利于于生物大分子分離純化。合成高分子層析介質的缺點是其疏水往往比軟膠大,導致非特異性吸附大,容易使使生物分子失去活性。因此聚合物微球表面需要進行親水化改性以降低其非特異性吸附才能滿足層析分離的需求。
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