凍存細胞復蘇步驟

1. 從冰箱中取出凍存的細胞，立即放入37℃水浴槽中快速解凍。

2. 待凍存管中細胞混合液完全融化后，將其中的混合液移至離心管中，1000rmp，5分鐘離心收集凍存細胞沉淀，移去上清液（操作時 小心，切勿將細胞沉淀移去）。

3. 加入適量的新鮮細胞培養(yǎng)基，使用移液管緩緩加入到細胞沉淀，輕柔地混勻，將細胞混合液移至事先準備好的培養(yǎng)容器中。

4. 鏡檢細胞后，細胞凍存液，可根據(jù)各自研究的需要和方法經(jīng)行細胞常規(guī)培養(yǎng)。

無血0清細胞凍存液，通用于各種動物細胞株（腫0瘤細胞和常規(guī)細胞），凍存細胞可在-80℃長期保存（>5年）。CELLS***ING配方成分明確，不含動物來源性蛋白，不含血0清，可減少各類***、病毒和支原體等污染，保證凍存細胞的安全。該凍存液含DMSO、葡萄糖等各種細胞營養(yǎng)成分，提高細胞存活率和活力，亦適合于無血0清培養(yǎng)細胞和蛋白表達細胞。

細胞凍存步驟

1. 常規(guī)方法收集對數(shù)期的貼壁細胞或懸浮細胞于試管中。

2. 根據(jù)培養(yǎng)細胞的密度和凍存管的大小確定所需凍存細胞數(shù)。

3. 將所需數(shù)目的細胞懸浮液置于離心管中，1000rmp，5分鐘離心收集培養(yǎng)細胞沉淀，徹0底棄去離心管中的上清液。

4. 加入適量的CELLS***ING?細胞凍存液于離心管中，使細胞濃度約為5×105-1×107/ml。輕柔地混勻細胞，制成細胞混合液。

5. 將離心管中的細胞混合液分裝于已標記的凍存管中，建議每管1ml或1.5ml。

6. 直接將分裝好的細胞凍存管放入-80℃超低溫冰箱中，可長期冷凍保存。

7. 如果想液氮中長期保存，需先放入-80℃冰箱至少一天時間，方可移至液氮罐中保存。

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