




6. 八臂迷宮實驗方法根據(jù)實驗目的的不同迷宮臂的數(shù)目可不同,包括8、16、24、32、40和48臂迷宮。迷宮臂越少要求動物記住探究過的臂也越小,動物的行為操作就越簡單。增加臂的數(shù)目一方面增加了對動物空間記憶的要求,另一方面也引入了更多的、有必要考慮的干擾因素(例如過去的迷宮學習對目前所測記憶的影響)。所以,通常使用8臂迷宮,既可減少不必要的、過多臂的干擾,又可縮短訓練和測試所花的時間。
7. 所用食物通常為小塊的、帶巧克力味(動物喜歡的味道之一)或甜味的早餐圈(每塊10mg);也可用液體食物(如巧克力奶或水)。后者對于測試某些影響動物對固體食物吞咽的尤為實用。
8. 影響動物迷宮操作主要有兩大因素:對迷宮或觀察者的恐懼與動物探究習性和已知放在迷宮臂內(nèi)食物的驅(qū)使。恐懼因素過強會阻止動物的迷宮操作,使動物始終停留在迷宮的某一個地方而不去探究。缺乏對食物的渴求也會產(chǎn)生類似結(jié)果,增加對動物的撫摸,必要時加高迷宮臂的側(cè)墻,有助于減少動物的恐懼。如食物的驅(qū)使作用不足,***動物模型購買,可減少食物量,***敲除小鼠,但必須同時監(jiān)測體重和一般身體狀況。通常大鼠體重不應(yīng)低于禁食前的80%;對多數(shù)大鼠,實驗動物,體重降低15%即可。
9. 與水迷宮不同,臂迷宮適合反復測試或長期記憶的測試。一般認為,工作記憶代表短期記憶,參考記憶代表長期記憶。
灌注固定主要用于***系統(tǒng),其他***意義不是很大,而且耗時耗力。對***系統(tǒng)防止變性效果較好!
小鼠灌注
灌流固定小鼠時一般采用輸液器的針頭 (4 號半,這樣肉眼可見就是肺部明顯充氣脹大變白,針頭要從心軸方向進針,然后刺入心尖 3~4 毫米左右就可以了,開始灌流后剪破右心耳,約 40 毫升生理鹽水,后再灌流約 20 毫升多聚甲醛,整個灌流固定的過程就完成了。
灌注固定主要用于***系統(tǒng),其他***意義不是很大,而且耗時耗力。對***系統(tǒng)防止變性效果較好!
小鼠灌注
灌流固定小鼠時一般采用輸液器的針頭 (4 號半,這樣肉眼可見就是肺部明顯充氣脹大變白,針頭要從心軸方向進針,然后刺入心尖 3~4 毫米左右就可以了,開始灌流后剪破右心耳,約 40 毫升生理鹽水,后再灌流約 20 毫升多聚甲醛,整個灌流固定的過程就完成了。
在各種致病因素作用下,大腦實質(zhì)受到損傷后可出現(xiàn)***功能改變,如偏癱、平衡失調(diào)等。
對于***系統(tǒng)***動物模型而言,造模結(jié)束只是步,驗證個體模型是否成功是第二步,而控制組內(nèi)個體特征一致性是第三步。
采用***功能評分是重要的觀察指標,可以用來在體評價模型是否成功或者病變嚴重程度。盡量控制動物模型的評分一致性是很困難但不得不做的一件事。
這里介紹三種常見的嚙齒類***功能評分方法。
一、【Longa評分法】
① 無***功能缺陷:0分;
②癱瘓側(cè)前爪不能完全伸展:1分;
③行走時向癱瘓側(cè)轉(zhuǎn)圈:2分;
④行走時向癱瘓側(cè)傾倒:3分;
⑤不能自動行走,存在意識喪失現(xiàn)象:4分。
二、【Bederson評分法】
抓起動物的尾巴,使動物離臺面10cm高。此時,正常大鼠的前爪處于伸直狀態(tài),而存在***功能病變的動物則可出現(xiàn)如下表現(xiàn):
① 無***功能缺陷:0分;
②動物尾巴提起后,癱瘓側(cè)前肢回收并屈于腹下,而正常側(cè)肢體伸向臺面:1分;
③除第二條表現(xiàn)以外,俯臥于臺面時向癱瘓側(cè)側(cè)推動物的阻力較正常側(cè)明顯降低:2分;
④除條和第二條以外,動物行走時向癱瘓側(cè)旋轉(zhuǎn):3分。
三、【平衡木評分法】
一根長為80cm、寬為2.5cm的木條,水平固定在離臺面10cm高度的地方,然后讓動物在木條上行走。
①能跳上平衡木條,可以自由行走但不跌倒:0分;
②能跳上平衡木條,北京動物模型,動物在上面行走會跌下,但跌下的機會小于50%:1分;
③能跳上平衡木條,動物在上面行走會跌下,但跌下的機會大于50%:2分;
④動物在正常側(cè)身體的幫助下可以跳上平衡木條;但是癱瘓側(cè)的后肢不能夠幫助身體向前移動:3分;
⑤動物無法在平衡木條上行走,但是可以坐在木條上:4分;
⑥將動物放在木條上,動物很快會掉落下來:5分。
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