自噬是一個吞噬自身細胞質(zhì)蛋白或細胞器并使其包被進入囊泡，并與溶酶體融合形成自噬溶酶體，降解其所包裹的內(nèi)容物的過程，借此實現(xiàn)細胞本身的代謝需要和某些細胞器的更新。自噬體，其直徑一般為 300 ~ 900 nm，平均 500 nm，囊泡內(nèi)常見的包含物有胞質(zhì)成分和某些細胞器如線粒體、內(nèi)吞體、過氧化物酶體等。與其他細胞器相比，自噬體的半衰期很短，只有 8 min 左右，說明自噬是細胞對于環(huán)境變化的有效反應。

外泌體分離提取方案。主要方案包括：

1、差速超1速離心法；

適用于細胞上清、灌洗液、尿液等大體積的樣品；

2、基于PEG沉淀原理的***盒法；

適用于血1清、腦脊液等小體積的樣品；

3、超濾提取法；

適用于***培養(yǎng)液或外泌體含量較低的樣品濃縮。亦可搭配超1速離心法，做進一步的提取。

外泌體是細胞外囊泡的一種，其膜來源與粒徑范圍與細胞外囊泡相似，電鏡下，顯示出典型的茶托狀超微結(jié)構(gòu)。實際操作中，通過常規(guī)的單一的方法很難鑒定外泌體。鑒定外泌體需要包含形態(tài)、粒徑、表面分子標記物等多方面的鑒定。具體方法包括：透射電鏡（形態(tài)鑒定）、NTA檢測（粒徑及濃度鑒定）、WB（分子標志物）。NTA檢測作為外泌體鑒定的經(jīng)典方法之一，可同時反映出檢測樣品的濃度及粒徑。質(zhì)量較好，純度較高的外泌體樣品，粒徑分布在30-150nm，原液濃度在10^9左右。為了保證檢測質(zhì)量，對每一個樣品，都會進行3次技術重復。檢測周期為2-3個工作日，可當天到樣當天出結(jié)果。

關于表皮層方面角質(zhì)形成細胞是表皮層的主要細胞，決定表皮層的厚度，決定皮膚自愈能力的強弱。在皮膚損傷后第三天，成纖維細胞開始產(chǎn)生細胞外基質(zhì)（包括纖連蛋白，I 型和III 型膠原蛋白等）。同時，上皮細胞開始增殖并向受傷區(qū)域邊緣遷移，加速傷口閉合，外泌體粒徑技術服務，減少皮膚感1染。因此，細胞增殖和皮膚再上皮化對皮膚再生至關重要。研究表明，來自不同來源MSC-exo都可以促進皮膚細胞增殖，并加速表皮再生。體內(nèi)實驗也證明，脂肪間充質(zhì)干1細胞外泌體（ADSC-exo）可促進角質(zhì)形成細胞在體外的遷移和增殖，提高皮膚傷口愈合速度，增加表皮的自愈能力。

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