石蠟切片制作流程1.取材：取材必須新鮮，切取材料時刀要銳利避免擠壓***，一般厚度不超過2mm，大小不超過5×5mm2，取后立即投入固定液。

2.固定：固定劑為***塊體積的10～15倍，一般為4%的中性多聚甲醛，固定時長24小時。

3.脫水：70%酒精→85%酒精→90%酒精→95%酒精→無水乙醇Ⅰ→無水乙醇Ⅱ（不同***脫水時間不同）

4.透明：透明劑能同時與脫水劑和石蠟混合，它取代了脫水劑后，石蠟便能順利地滲入***

石蠟包埋切片實驗基本步驟主要有以下幾步：

1、取材：新鮮***固定于4%多聚甲醛24h以上。將***從固定液取出在通風櫥內(nèi)用***刀將目的部位***修平整，將修切好的***和對應的標簽放于脫水盒內(nèi)。

2、脫水：將脫水盒放進吊籃里于脫水機內(nèi)依次梯度酒精進行脫水。75%酒精4h-85%酒精2h-90%酒精2h-95%酒精1h-無水乙醇I 30min-無水乙醇II 30min-醇苯5-10min-I5-10min-II5-10min-蠟I1h-蠟II1h-蠟III 1h。

3、包埋：將浸好蠟的***于包埋機內(nèi)進行包埋。先將融化的蠟放入包埋框，待蠟凝固之前將***從脫水盒內(nèi)取出按照包埋面的要求放入包埋框并貼上對應的標簽。于-20°凍臺冷卻，蠟凝固后將蠟塊從包埋框中取出并修整蠟塊。

4、切片：將修整好的蠟塊置于石蠟切片機上切片，片厚4μm。切片漂浮于攤片機40℃溫水上將***展平，用載玻片將***撈起，病理切片技術服務，并放進60℃烘箱內(nèi)烤片。待水烤干蠟烤化后取出常溫保存?zhèn)溆谩?/p>



切片經(jīng)HE染色后，要脫水透明，才能用中性樹膠封蓋。he染色對于貼壁生長細胞，胰酶消化，調(diào)整細胞濃度約1×105/ml，滴加于蓋玻片上(置于6孔板中)，培養(yǎng)相應時間后，取出細胞爬片，用PBS 洗滌3次。著況與***或細胞的種類有關。切片在蘇mu素染液中停留過長；或切片太厚；或分化時間太短。這種情況首先鏡下看看切片厚度(佳厚度1-2層細胞核)，要么重新染色，要么重新制片。染色的終結果是：細胞核呈藍色、胞質(zhì)、肌纖維、膠原纖維和紅細胞呈深淺不一樣的紅色，病理技術服務提醒：在進行HE染色需要染色時間，脫水，染色時間不一樣，需要等 ，明確HE評判標準。



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