




武漢思特進科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術研發(fā)、實驗產品研發(fā)、日化產品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術公司;公司實驗中心有分子生物學平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產品生產平臺;可以開展各類動、植物、***、細胞等生物實驗。1)將探針回收,放于-20C保存(通常探針可重復使用十次左右)。
原位雜交:在研究DNA分子原理的基礎上發(fā)展起來的一種技術。尤其在***分析和診斷方面能作定性、***和定量分析,已成為的分子病理學技術,同時在分析低豐度和罕見的mRNA表達方面已展示了分子生物學的一重要方向。其基本原理是兩條核苷酸單鏈片段,在適宜的條件下,能過氫鍵結合,形成DNA-DNA、DNA-RNA或 RNA-RNA 雙鍵分子的特點,應用帶有標記的(有性同位素,如3H、35S、32P、熒光素生物素、等非性物質)DNA或RNA片段作為核酸探針,與***切片或細胞內待測核酸(RNA或DNA)片段進行雜交,然后可用自顯影等方法予以顯示,在光鏡或電鏡下觀察目的 mRNA或DNA 的存在并***;
武漢思特進科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術研發(fā)、實驗產品研發(fā)、日化產品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術公司;公司實驗中心有分子生物學平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產品生產平臺;可以開展各類動、植物、***、細胞等生物實驗。mFISH能同時檢測多個***,分辨復雜的染色體易位和微小缺失,區(qū)分間期細胞多倍體和超二倍體等。
原位雜交天1. 重新水化和固定1) 吸取固定好的胚胎,加入50%的PBST溶液,放置5分鐘。與病理學檢查結果比較,FISH檢測的特異性為100%,敏***為87%。2) 置換成30%的PBST溶液,放置5分鐘3) 置換成PBST溶液,放置5分鐘,重復一次4) 置換成4%多聚甲醛的PBS溶液固定20分鐘5) 用PBST洗兩次,每次放置五分鐘,室溫。用10ul/ml的蛋白酶K在室溫下處理胚胎。5體節(jié)以下的胚胎不處理,5體節(jié)到24小時的胚胎處理3分鐘,24小時以上的胚胎處理5分鐘或者更長。發(fā)育時間越短的胚胎越嫩,可以不用或者少用蛋白酶處理,發(fā)育時間長的胚胎就需要用蛋白酶來疏松***,以便于雜交。
武漢思特進科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術研發(fā)、實驗產品研發(fā)、日化產品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術公司;公司實驗中心有分子生物學平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產品生產平臺;可以開展各類動、植物、***、細胞等生物實驗。方法應用FISH技術分析110例血尿患者尿脫落細胞染色體異常情況,其中包括86例、泌尿系12例、濾泡(腺性)4例、良性(狀瘤)4例、不明原因血尿4例。
與其他原位雜交技術相比,熒光原位雜交具有很多優(yōu)點,主要體現(xiàn)在:①FISH不需要性同位素標記,更經濟安全。這些固定液都有不同的優(yōu)缺點因此要根據(jù)具體的實驗對象,選擇的固定液。②FISH的實驗周期短,探針穩(wěn)定性高,特異性好,***準確,能迅速得到結果。③FISH通過多次化學反應,使雜交信號增強,靈敏度提高,其靈敏度與性探針相當。④多色FISH通過在同一個核中顯示不同的顏色可同時檢測多種序列。⑤既可以在玻片上顯示中期染色體數(shù)量或結構的變化。也可以在懸液中顯示間期染色體DNA的結構。 [1]
